测定了与三氯化钌(RHT)[RHT-环己酮配合物(RHT-CC)、五胺钌-N-二甲基苯二亚胺(PRT)、三-(联吡啶基)钌(Ⅱ)氯化物(TRC)、三(联吡啶基)铁(Ⅱ)氯(TIC)和六胺三氯化钴(CHT)]有关的各种阳离子染料在原位沉淀软骨基质蛋白聚糖的效果。
染料在加工开始时就被引入到培养基中,并且在醛固定和四氧化锇固定过程中都存在。
与预期相反,大多数染料-蛋白多糖复合物在醛固定条件下生成并稳定,尽管染料继续存在,但在固定后仍不稳定。
通常用于软骨组织切片中蛋白质多糖沉淀的阳离子染料(如吖啶橙、阿新蓝、Azure A、亚甲基蓝和钌红)也有类似的现象。
只有两种染料,即RHT和新近测试的RHT-CC,在四氧化锇固定后形成足够稳定的蛋白多糖沉淀,以抵抗断裂和萃取。
后者可能是特别有用的半定量分析蛋白质多糖含量,在未染色的组织切片,因为它的强烈的棕黑色。
对于可省略四氧化锇固定后步骤的应用,TRC和PRT由于其稳定的荧光和强烈的紫罗兰色信号,在半定量组织化学中也有一定的应用价值。
|