纳米材料在细胞中活性氧检测方法

发表于 2024-7-15 21:51:38

请问各位大佬，我的纳米材料550nm左右有荧光，用DCFH-DA和DHE检测均能够看到材料荧光的干扰，无法确定是产生的荧光还是材料自带的荧光，请问还能用什么其他的方法检测细胞内的活性氧呢？跪求

发表于 2024-7-15 21:51:39

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发表于 2024-7-16 10:45:59

如果您希望避免纳米材料本身的荧光干扰，可以考虑以下几种方法来检测细胞内的活性氧:

Amplex UltraRed (AUR) 检测法: Amplex UltraRed 是一种高选择性的荧光探针，用于检测超氧化物。它可以被超氧化物还原生成的过氧化氢催化转化为强荧光产物。这种方法相对于传统的DHE（dihydroethidium）检测，其荧光产物的激发波长为545 nm，发射波长为590 nm，可避免550 nm的纳米材料荧光的干扰。

HyPer 构建物: HyPer 是一种基于融合蛋白的荧光蛋白质，它对过氧化氢（H2O2）非常敏感。它可以被用作实时监测细胞内过氧化氢水平的工具，而不受到纳米材料荧光的影响。

流式细胞术: 可以使用具有特异性荧光探针的流式细胞术来检测活性氧。例如，使用特定于超氧化物或过氧化氢的探针标记细胞，并通过流式细胞仪进行定量分析，避免光学干扰。

化学荧光探针的选择: 选择具有波长不同于550 nm的荧光探针，以确保能够清晰地检测活性氧的产生，而不受到纳米材料自身荧光的影响。例如，有些探针的激发和发射波长在600 nm以上，这些探针可以与550 nm附近的纳米材料荧光分开。

通过选择适当的探针和方法，可以有效地避免纳米材料荧光干扰，从而准确地检测细胞内活性氧的水平。

发表于 2024-7-16 12:07:08

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