请教一下各位大佬,最近构建载体,采用单酶切切胶回收,但是一直载体自连,请问有什么方法可以降低载体自连吗

丁金金 发表于 2022-6-30 18:04:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
请教一下各位大佬,最近构建载体,采用单酶切切胶回收,但是一直载体自连,请问有什么方法可以降低载体自连吗
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酵母打工仔 发表于 2022-6-30 19:59:42 | 显示全部楼层
可将酶切回收后的质粒与未酶切的质粒跑个胶,确定一下质粒是否切开。环状质粒会比线性的跑的快。如果确定切开,建议化转时增加插入片段的ng数,降低线性载体ng。

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