我在纯化蛋白后，使用30kd的虑柱离心浓缩蛋白后，发现蛋白量减少了很多。 1、所有操作当天完成，不存在蛋白大量降解 2、离心后的滤液中不含蛋白 3、反复润洗过滤膜，甚至倒扣离心。

发表于 2023-9-26 16:51:20

我在纯化蛋白后，使用30kd的虑柱离心浓缩蛋白后，发现蛋白量减少了很多。 1、所有操作当天完成，不存在蛋白大量降解
2、离心后的滤液中不含蛋白
3、反复润洗过滤膜，甚至倒扣离心。

发表于 2023-9-26 16:51:21

1,测蛋白的时候，蛋白浓度需要在线性范围，比如滤液浓度可能很低就测不到。2，蛋白超滤的时候会容易聚集，有的蛋白会部分沉淀，溶液中的蛋白浓度算出来也有差别。3，再次，操作过程中的管壁什么的都会有损失。

发表于 2023-9-27 09:53:33

chien2023 发表于 2023-9-27 09:04
1,测蛋白的时候，蛋白浓度需要在线性范围，比如滤液浓度可能很低就测不到。2，蛋白超滤的时候会容易聚集， ...

感谢您的回复，我有注意到超滤后出现了一些沉淀，可能如您所说。对于蛋白聚集、沉淀这个现象您有更好的建议吗？感谢您宝贵的意见！

[已完结] 我在纯化蛋白后，使用30kd的虑柱离心浓缩蛋白后，发现蛋白量减少了很多。 1、所有操作当天完成，不存在蛋白大量降解 2、离心后的滤液中不含蛋白 3、反复润洗过滤膜，甚至倒扣离心。