前辈好。我目前是在粗提阶段，做了“硫酸铵沉淀法”、“有机溶剂萃取法”、“酸沉醇提法”，比较这3种方法哪一种得到的粗提物的抑菌效果更好。遇到的问题有：1.硫酸铵盐析后采用500D、1KD、2KD、3.5KD、10KD的透析袋除盐，但透析后500D、1KD、2KD的没有抑菌效果，而3.5KD和10KD的有抑菌效果。按理说不应该是500D的透析袋截留的抑菌物质会更多吗？2.酸沉醇提法得到酸上清和沉淀，我用甲醇不能完全溶解酸沉淀，过夜也还是有一部分不溶物，取沉淀复溶液和酸上清（均调回原始pH）做抑菌试验，发现沉淀复溶液的抑菌效果还不如酸上清，文献里别人都是用沉淀复溶往后做纯化试验，但我的沉淀复溶效果却不好。怀疑是因为抑菌物质大多存在不溶物里，但不溶物被我离心后舍弃了。目前没想到更好的优化方式，不知道前辈有没有遇到过这种情况。3.有机溶剂萃取，发现正丁醇可以萃取得到部分抑菌物质（水相还残留有抑菌物质、但比起其它有机试剂、正丁醇的萃取结果是最佳）、抑菌效果还可以。打算用正丁醇萃取得到的有机相往后做纯化，先做TLC试验、接着做硅胶柱层析。因为我完全没有有机化学背景，目前查了很多相关的操作步骤和注意事项，这周自己先摸索试一试。 |
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帮帮孩子吧，请前辈喝咖啡。
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