质粒转化后菌液测序有一个碱基出错，质粒本身测序没问题，请问可能是污染引起的吗？哪些步骤容易造成污染？

发表于 2024-2-26 10:23:59

质粒转化后菌液测序有一个碱基出错，质粒本身测序没问题，请问可能是污染引起的吗？哪些步骤容易造成污染？
三次做转化菌液测序都在同一个碱基出现相同的错误，那个位置是个重叠峰，正确碱基和错误碱基都在50%左右。本来怀疑质粒有问题，没想到质粒测序是正确的，也没有重叠峰出现了，请问可能是污染引起的吗？质粒转化过程中哪些步骤容易造成污染？

发表于 2024-2-26 10:24:00

１，菌液测序准确率本身就要低不少，特别是那种快速测序的；，靠前，和靠后的都不准确；２，可以重新转化质粒，不能转太多，要挑去单克隆，然后提好质粒送测一下；

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